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二氧化碳培養(yǎng)箱的常見污染及防控措施

更新時(shí)間:2020-11-16點(diǎn)擊次數(shù):1989

二氧化碳培養(yǎng)箱的常見污染及防控措施
二氧化碳培養(yǎng)箱用途廣泛,主要用來培養(yǎng)細(xì)胞、組織和某些特殊微生物,為它們提供一個(gè)良好的體外培養(yǎng)環(huán)境,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、組織學(xué)實(shí)驗(yàn)以及分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。因此,二氧化碳培養(yǎng)箱的清潔維護(hù)尤為重要。
二氧化碳培養(yǎng)箱的常見污染
  進(jìn)入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)環(huán)境中,對細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)視為污染。不同的污染物對細(xì)胞的影響也有差別,有的影響是長期、緩慢和潛在的,而有的則能在很短的時(shí)間內(nèi)抑制細(xì)胞生長或殺死細(xì)胞。根據(jù)污染源不同主要可以分為:生物性污染、化學(xué)性污染、物理性污染和氣溶膠污染。
  1、生物性污染:
  這是常見也是危害大的污染。如細(xì)菌、病毒、真菌,支原體等。這些污染源有可能是人為帶入,或是細(xì)胞在放入二氧化碳培養(yǎng)箱前已經(jīng)受污染,再或者是箱體本身沒有消毒干凈。體外培養(yǎng)的細(xì)胞自身沒有抵抗污染的能力,而培養(yǎng)基中所加抗生素的抗微生物污染的能力也是有限的,因而細(xì)胞微生物污染一旦發(fā)生往往是無法挽救的。
  2、化學(xué)性污染:
  二氧化碳培養(yǎng)箱中許多化學(xué)物質(zhì)都可以引起細(xì)胞污染。如細(xì)胞培養(yǎng)容器清洗過程中殘留的洗滌劑、加濕器中未純化的水、人為帶入的液體或氣體都可能成為化學(xué)性污染的來源。不同化學(xué)物質(zhì)對細(xì)胞污染是不一樣的,有的可能促進(jìn)或抑制細(xì)胞生長,有的甚至殺死細(xì)胞。
  3、物理性污染:
  培養(yǎng)環(huán)境中的物理因素,如溫度、放射線、振動(dòng)、輻射(紫外線或熒光)會對細(xì)胞產(chǎn)生影響。物理性污染常常被人們所忽視,其主要是在代謝水平或分子水平上,影響細(xì)胞正常的生理過程。
  4、氣溶膠污染:
  氣溶膠是液體或固體微粒均勻地懸浮在氣體介質(zhì)中的分散體系,當(dāng)微粒是微生物時(shí),就是微生物氣溶膠,如果這種微生物是病原性的,就是病原微生物氣溶膠。細(xì)菌、病毒等病原體通過氣溶膠可在人與人、人與環(huán)境之間傳播。
二氧化碳培養(yǎng)箱污染防控措施
  1、二氧化碳培養(yǎng)箱的選擇:
  二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們設(shè)計(jì)了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,其主要是防污染設(shè)計(jì)和消毒滅菌系統(tǒng)的改進(jìn),以達(dá)到消毒滅菌的目的。如帶有紫外消毒功能的二氧化碳培養(yǎng)箱、帶HEPA過濾器凈化空氣的二氧化碳培養(yǎng)箱,以及帶高溫滅菌的二氧化碳培養(yǎng)箱等,后者又分為高溫干熱和高溫濕熱兩類。這些裝置的滅菌能力各有千秋,紫外燈消毒范圍有限,距離燈越遠(yuǎn),或者被遮擋,消毒能力越差。
  HEPA過濾器的過濾膜孔徑有限,無法去除病毒和一些微小細(xì)菌,并且容易損耗,也有其局限性。相比而言,高溫滅菌則是比較有效的方法。而高溫干熱和高溫濕熱也有所不同,不同方法的滅菌效率與溫度的高低也有著直接的關(guān)系。上海潤度生物推出的Herocell系列二氧化碳培養(yǎng)箱可進(jìn)行140℃的高溫干熱滅菌,當(dāng)然也可進(jìn)行90℃的濕熱滅菌,為用戶的滅菌方式提供了豐富的可選擇性。
  2、培養(yǎng)工作人員習(xí)慣:
  人為因素和態(tài)度可以對環(huán)境、人和物起到一個(gè)正面或負(fù)面的影響。以安全為目的,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的工作人員應(yīng)明白自身的態(tài)度和人為因素對實(shí)驗(yàn)環(huán)境的重要性。因此,對實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行專業(yè)培訓(xùn)對防污染有著重要作用。
  3、重視管理:
  細(xì)胞室內(nèi)的二氧化碳培養(yǎng)箱應(yīng)由專人負(fù)責(zé)管理,定期對系統(tǒng)進(jìn)行校正,至少每年一次。各項(xiàng)數(shù)值一旦固定后,不要隨意調(diào)節(jié),以免影響箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度的波動(dòng),降低機(jī)器的靈敏度,同時(shí)還會影響二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)的細(xì)胞生產(chǎn)狀態(tài)。
  使用前,對二氧化碳培養(yǎng)箱的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)校正,并且對箱體和內(nèi)部進(jìn)行消毒處理,等各項(xiàng)數(shù)值穩(wěn)定一段時(shí)間后方可使用。一旦出現(xiàn)緊急問題,應(yīng)及時(shí)上報(bào),應(yīng)由專業(yè)的人員進(jìn)行操作,采取應(yīng)對措施,以免造成不必要的損失。
  4、規(guī)范操作:
  二氧化碳培養(yǎng)箱的使用雖然很簡單,但同樣需要規(guī)范操作。進(jìn)細(xì)胞室穿著實(shí)驗(yàn)服,換上拖鞋或者穿一次性的鞋套。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)帶一次性手套,特別是打開二氧化碳培養(yǎng)箱前,先用75%的酒精噴壺噴洗雙手再開二氧化碳培養(yǎng)箱,再取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板。顯微鏡下查看細(xì)胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板后,再放回二氧化碳培養(yǎng)箱時(shí),同樣也要噴酒精消毒。
  二氧化碳培養(yǎng)箱的兩個(gè)門開關(guān)取(放)物要迅速,不可長時(shí)間開著,否則會影響CO2的濃度、溫度和濕度,以及造成污染。尤其是不要忘了關(guān)好里層的玻璃門。切記開門時(shí)不要對著二氧化碳培養(yǎng)箱說話,大口呼吸或打噴嚏。
  5、加強(qiáng)防護(hù):
  如果實(shí)驗(yàn)人員生病而攜帶病菌,應(yīng)帶上口罩再進(jìn)細(xì)胞室,病情嚴(yán)重的則不宜進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。女性同志實(shí)驗(yàn)時(shí)頭發(fā)應(yīng)梳起,防止皮屑污染及連帶事件的發(fā)生。如果實(shí)驗(yàn)室條件允許,可以每人佩戴實(shí)驗(yàn)帽、手套和口罩,以防污染二氧化碳培養(yǎng)箱及對實(shí)驗(yàn)人員的自身的防護(hù)。
  6、注重保養(yǎng):
  二氧化碳培養(yǎng)箱置于細(xì)胞室中,室內(nèi)需保持干燥,環(huán)境溫度不能超過30℃(建議保持在18℃-30℃)。二氧化碳培養(yǎng)箱放置在遠(yuǎn)離門窗、供暖設(shè)備和空調(diào)導(dǎo)管的地方,不能被陽光直接照射。二氧化碳培養(yǎng)箱的放置臺面水平避震且非易燃材質(zhì),不能靠在墻壁或類似的建筑物上,其后部接電處和墻壁至少保留30cm的空間。一旦放好不宜再移動(dòng)。
  7、校正處理:
  二氧化碳培養(yǎng)箱在放好后,再對箱體和內(nèi)部進(jìn)行消毒處理,并且對各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)校正,等各項(xiàng)數(shù)值穩(wěn)定一段時(shí)間后方可使用。因CO2氣體對于健康是有害的,因此細(xì)胞室需安裝足夠的通風(fēng)裝置??諝庵械姆蹓m氣溶膠易造成二氧化碳培養(yǎng)箱的污染,需要一個(gè)流通的空氣環(huán)境。將二氧化碳培養(yǎng)箱的管理任務(wù)分派給有經(jīng)驗(yàn)的檢查人員是重要的。如長期不使用二氧化碳時(shí),應(yīng)將CO2開關(guān)關(guān)閉,防止CO2調(diào)節(jié)器失靈,避免給實(shí)驗(yàn)室?guī)戆踩允录?/span>

TEL:0571-86139637

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